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IC分離方式和檢測(cè)方式的選擇

更新時(shí)間:2010-03-16      點(diǎn)擊次數(shù):1549

  分析者對(duì)待測(cè)離子應(yīng)有一些一般信息,首先應(yīng)了解待測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)以及樣品的基體情況,如無(wú)機(jī)還是有機(jī)離子,離子的電荷數(shù),是酸還是堿,親水還是疏水,是否為表面活性化合物等。待測(cè)離子的疏水性和水合能是決定選用何種分離方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的離子,如Cl-或K+,用HPIC分離。水合能低和疏水性強(qiáng)的離子,如高氯酸(ClO4-)或四丁基銨,用親水性強(qiáng)的離子交換分離柱或MPIC分離。有一定疏水性也有明顯水合能的pKa值在1與7之間的離子,如乙酸鹽或丙酸鹽,用HPICE分離。有些離子,既可用陰離子交換分離,也可用陽(yáng)離子交換分離,如氨基酸,生物堿和過(guò)渡金屬等。
  很多離子可用多種檢測(cè)方式。例如測(cè)定過(guò)渡金屬時(shí),可用單柱法直接用電導(dǎo)或脈沖安培檢測(cè)器,也可用柱后衍生反應(yīng),使金屬離子與PAR或其它顯色劑作用,再用UV/VIS檢測(cè)。一般的規(guī)律是:對(duì)無(wú)紫外或可見(jiàn)吸收以及強(qiáng)離解的酸和堿,用電導(dǎo)檢測(cè)器;具有電化學(xué)活性和弱離解的離子,用安培檢測(cè)器;對(duì)離子本身或通過(guò)柱后反應(yīng)后生成的絡(luò)合物在紫外可見(jiàn)有吸收或能產(chǎn)生熒光的離子和化合物,用UV/VIS或熒光檢測(cè)器。若對(duì)所要解決的問(wèn)題有幾種方案可選擇,分析方案的確定主要由基體的類型、選擇性、過(guò)程的復(fù)雜程度以及是否經(jīng)濟(jì)來(lái)決定。表1和2總結(jié)了對(duì)各種類型離子可選用的分離方式和檢測(cè)方式。
  離子色譜柱填料的發(fā)展推動(dòng)了離子色譜應(yīng)用的快速發(fā)展,對(duì)多種離子分析方法的開(kāi)發(fā)提供了多種可能性。特別應(yīng)提出的是在pH 0-14的水溶液和100%有機(jī)溶劑(反相液相色譜用有機(jī)溶劑)中穩(wěn)定的親水性高容量柱填料的商品化,使得離子交換分離的應(yīng)用范圍加擴(kuò)大。常見(jiàn)的在水溶液中以離子形態(tài)存在的離子,包括無(wú)機(jī)和有機(jī)離子,以弱酸的鹽(Na2CO3/NaHCO3, KOH、NaOH)或強(qiáng)酸(H2SO4、甲基磺酸、HNO3、HCl)為流動(dòng)相,陰離子交換或陽(yáng)離子交換分離,電導(dǎo)檢測(cè),已是成熟的方法,有成熟的色譜條件可參照。對(duì)近中性的水可溶的有機(jī)“大”分子(相對(duì)常見(jiàn)的小分子而言),若待測(cè)化合物為弱酸,則由于弱酸在強(qiáng)堿性溶液中會(huì)以陰離子形態(tài)存在,因此選用較強(qiáng)的堿為流動(dòng)相,陰離子交換分離;若待測(cè)化合物為弱堿,則由于在強(qiáng)酸性溶液中會(huì)以陽(yáng)離子形態(tài)存在,選用較強(qiáng)的酸作流動(dòng)相,陽(yáng)離子交換分離;若待測(cè)離子的疏水性較強(qiáng),由于與固定相之間的吸附作用而使保留時(shí)間較長(zhǎng)或峰拖尾,則可在流動(dòng)相中加入適量有機(jī)溶劑,減弱吸附,縮短保留時(shí)間、改善峰形和選擇性。對(duì)該類化合物的分離也可選用離子對(duì)色譜分離,但流動(dòng)相中一般含有較復(fù)雜的離子對(duì)試劑。此外,對(duì)弱保留離子可選用高容量柱和弱淋洗液以增強(qiáng)保留,對(duì)強(qiáng)保留離子則反之。在水溶液中以離子形態(tài)存在的離子,即較強(qiáng)的酸或堿,應(yīng)選用電導(dǎo)檢測(cè)。具有對(duì)紫外或可見(jiàn)光有吸收基團(tuán)或經(jīng)柱后衍生反應(yīng)后(IC中較少用柱前衍生)生成有吸光基團(tuán)的化合物,選用光學(xué)檢測(cè)器。具有在外加電壓下可發(fā)生氧化或還原反應(yīng)基團(tuán)的化合物,可選用直流安培或脈沖安培檢測(cè)。對(duì)一些復(fù)雜樣品,為了一次進(jìn)樣得到較多的信息,可將兩種或三種檢測(cè)器串聯(lián)使用。

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